| |
Цель исследования – изучить изменения электрических и вязкоупругих параметров эритроцитов у пациентов с болезнью Крона в стадии обострения после экспозиции с растворами омега-3 ПНЖК (эйкозапентаеновой, докозагексаеновой) в эксперименте in vitro.
Материалы и методы. Обследован 41 пациент с болезнью Крона (средний возраст 38 ± 13,05 лет) в стадии обострения и 53 человека группы сравнения, сопоставимые с основной группой по полу и возрасту. Электрические и вязкоупругие параметры эритроцитов исследованы в неоднородном переменном электрическом поле на четырех частотах 5*104 Гц, 105 Гц, 5*105 Гц и 106 Гц методом диэлектрофореза дважды: до и после экспозиции в течение 2 часов с 10 мкл эйкозапентаеновой (ЭПК, 20:5 n-3) и 10 мкл докозагексаеновой (ДГК, 22:6 n-3) омега 3 ПНЖК (Sigma-Aldrich, США).
Результаты. Эритроциты пациентов с болезнью Крона в стадии обострения отличались от эритроцитов лиц контрольной группы увеличением количества сфероцитарных, деформированных форм клеток с измененной поверхностью при снижении доли дискоцитов (p < 0,00001). Амплитуда деформации клеток на высоких частотах у больных с БК оказалась ниже на фоне повышенных обобщенных показателей вязкости и жесткости (p < 0,00001). У пациентов с БК эритроциты имели склонность к образованию агрегатов и деструкции на разных частотах электрического поля (p = 0,014-0,05). Поляризуемость на частотах 106, 0,5 × 106, 105 Гц оказалась ниже, а на частоте (0,5 × 104) Гц выше (p = 0,0001-0,03). при наличии воспалительного заболевания кишечника по сравнению с группой контроля. Эритроциты пациентов с болезнью Крона имели более высокие уровни электропроводности и более низкие – емкости мембран, скорости движения к электродам, дипольного момента, чем в контроле (p = 0,0001-0,0008). Равновесная частота у пациентов с ВЗК оказалась смещенной в высокочастотный диапазон.
Экспозиция эритроцитов пациентов с болезнью Крона in vitro в течение 2 часов с 10 мкл растворов эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот привела к достоверному изменению электрических и вязкоупругих параметров эритроцитов: снижению обобщенных показателей жесткости, вязкости клеток, электропроводности, индексов агрегации и деструкции на всех частотах электрического поля, повышению уровней емкости, дипольного момента, скорости движения клеток к электродам, поляризуемости (p=0,001-0,05). Выявлены тенденции к увеличению диаметра эритроцитов, амплитуды деформации клеток на высоких частотах электрического поля, доли дискоцитарных форм при снижении сфероцитарных, деформированных. Отмечен тренд к смещению равновесной частоты в низкочастотный диапазон. Наблюдаемые изменения электрических и вязкоупругих параметров эритроцитов, вероятно, обусловлены модификацией структуры мембран (мембранных сигнальных платформ) под воздействием омега-3 полиненасыщенных жирных кислот, изменением активности мембранных белков – рецепторов и ферментов, выполняющих транспортные функции, и косвенным влиянием на цитозоль клетки.
Заключение. Выявленные эффекты омега-3 ПНЖК на электрические и вязкоупругие параметры эритроцитов у пациентов с болезнью Крона в стадии обострения могут быть перспективны как дополнительные воздействия для индукции и поддержания ремиссии при данном заболевании.
Ключевые слова:омега-3 полиненасыщенные жирные кислоты, электрические, вязкоупругие параметры эритроцитов, диэлектрофорез, болезнь Крона, эксперимент in vitro
|
