ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО РАЗДЕЛЕНИЯ КЛЕТОЧНЫХ БЕЛКОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ МЕЛИОИДОЗА

Король Екатерина Васильевна, Терешко Дмитрий Леонидович, Новицкая Ирина Вячеславовна, Печёнкина Любовь Анатольевна, Шаров Тимур Николаевич

Статья посвящена оценке эффективности различных способов выделения и концентрирования белковых фракций внутриклеточных компонентов возбудителя мелиоидоза. Целью исследования был сравнительный анализ эффективности использования вариантов хроматографического метода для выделения отдельных белковых фракций внутриклеточных компонентов возбудителя мелиоидоза на примере полноценного в антигенном составе B. pseudomallei 57576. Методы. Объектом исследования служил коллекционный штамм возбудителя мелиоидоза B. pseudomallei 57576, а также фракции, выделенные из исходной бактериальной взвеси. Штаммы B. обеззараживали, затем компоненты клеток и вирионы разделяли методами анионообменной, гидрофобной и эксклюзионной хроматографии. Анализ препаратов проводили с помощью электрофореза в полиакриламидном геле и реакции ИФА. Результаты. Выделено и проанализировано 30 фракций материала, содержащих различные компоненты исходной бактериальной взвеси. Определено, что наибольшую активность в методе ИФА со специфическими иммунными сыворотками от мышей показали гидрофобные компоненты бактериальной массы после гидрофобной хроматографии с сорбентами «5RPC» (титр 1:400). Показано, что метод гидрофобной хроматографии оказался оптимальным для решения поставленной задачи, так как позволил наиболее эффективно сконцентрировать и очистить обладающие иммунологическими свойствами фракции.

Ключевые слова:мелиоидоз, хроматография, особо опасные инфекции, антиген.